ДИАГНОСТИКА ГЕМОБЛАСТОЗОВ

Оценка интенсивности флюоресценции методом проточной цитометрии: методические аспекты внедрения в диагностику онкогематологических заболеваний

А.В. Куртова, Е.Б. Русанова , Е.Е. Зуева
«Клиническая онкогематология», декабрь 2008

Оценка иммунофенотипического профиля трансформированных клеток является одним из базовых компонентов диагностики онкогематологических заболеваний. Антигенный профиль, позволяющий дифференцировать нормальные и трансформированные клетки, может быть успешно идентифицирован при помощи окрашивания с использованием меченых моноклональных антител.

Классическая многоцветная проточная цитометрия в подавляющем большинстве случаев проводит границу между позитивными и негативными клетками, реже применяя более дифференцированную оценку позитивности в зависимости от яркости флюоресценции с выделением популяций dim и bright. Активное развитие метода проточной цитометрии позволило значительно расширить возможности более детальной оценки показателей флюоресценции. В последнее время анализу интенсивности флюоресценции маркеров уделяют особое внимание именно в онкогематологии по двум причинам. Во-первых, интенсивность флюоресценции (ИФ) напрямую отражает степень экспрессии определенных молекул, имеющих диагностическую ценность. Поэтому учет ИФ позволяет расширить характеристику трансформированных клеток и выйти за пределы дихотомического анализа позитивности/негативности. Во-вторых, достаточно острой проблемой в диагностике онкогематологических заболеваний является определение границы позитивности окрашивания. Относительное содержание (процентное выражение количества) позитивных клеток среди всех анализируемых событий, безусловно, оправдано в случае дискретного разделения целевой популяции. Тем не менее, определение процента позитивных клеток бывает затруднено и невоспроизводимо во многих клинически значимых ситуациях.

Представленная работа посвящена методическим аспектам учета интенсивности флюоресценции в рамках диагностики онкогематологических заболеваний методом проточной цитометрии в лечебно-профилактических учреждениях и ориентирована на опытных врачей клинической лабораторной диагностики.